技術(shù)文章
細(xì)胞培養(yǎng)室無菌建設(shè)及注意事項(xiàng)如下:
一、無菌室建設(shè)
結(jié)構(gòu)與布局:
細(xì)胞培養(yǎng)室應(yīng)包含更衣間、緩沖間和無菌操作間三個(gè)主要部分。
更衣間:供實(shí)驗(yàn)人員更換衣服、鞋子及穿戴帽子、口罩和手套。
緩沖間:位于更衣間與無菌操作間之間,用于放置恒溫培養(yǎng)箱及某些小型儀器,同時(shí)確保無菌操作間的無菌環(huán)境。
無菌操作間:專用于無菌操作和細(xì)胞培養(yǎng)。其大小應(yīng)適當(dāng),頂部高度不超過2.5米,以保證紫外線的滅菌效果。墻壁應(yīng)光滑不存在死角,便于清潔和消毒。
設(shè)備與設(shè)施:
潔凈工作臺(超凈臺):是細(xì)胞培養(yǎng)中必需的設(shè)備,利用空氣層流裝置排除工作臺面上的塵埃和微生物。主要有側(cè)流式(垂直式)和外流式(水平層流式)兩種。
CO?培養(yǎng)箱:為細(xì)胞提供一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、CO?濃度和濕度等。
顯微鏡:用于觀察細(xì)胞的生長情況和污染狀況。
其他:還包括超純水機(jī)、單細(xì)胞懸液制備儀等設(shè)備。
二、注意事項(xiàng)
無菌操作:
實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入無菌室前,應(yīng)先關(guān)掉紫外燈,至少等待15分鐘后再進(jìn)入。
進(jìn)入無菌室前,需用肥皂或消毒液洗手消毒,并在緩沖間更換專用工作服、鞋、帽子、口罩和手套。
實(shí)驗(yàn)過程中,應(yīng)定期用消毒劑擦拭臺面及操作臺上的物品,保持工作區(qū)域的清潔和無菌。
材料準(zhǔn)備:
使用無菌的哺乳牛血清,并在低溫下儲存。
使用新的、未污染的塑料制品和玻璃儀器。
準(zhǔn)備足夠的消毒劑,如70%的乙醇、有效次氯酸鈉等,并正確配制和使用。
通風(fēng)與清潔:
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有良好的通風(fēng)系統(tǒng),確??諝饬魍ê蜏p少污染。
定期清潔和消毒實(shí)驗(yàn)室環(huán)境,包括地面、墻壁、工作臺等。
儲藏與消毒:
無菌物品應(yīng)保存在無菌包或滅菌容器內(nèi),并按消毒日期順序放置在固定的柜櫥內(nèi)。
CO?培養(yǎng)箱等設(shè)備應(yīng)定期檢查、清洗和消毒,以確保其無菌狀態(tài)。
個(gè)人防護(hù):
實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)穿戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備,如手套、口罩等,以防止細(xì)菌或病毒的感染。
綜上所述,細(xì)胞培養(yǎng)室的無菌建設(shè)及注意事項(xiàng)涉及多個(gè)方面,包括無菌室的結(jié)構(gòu)與布局、設(shè)備與設(shè)施、無菌操作、材料準(zhǔn)備、通風(fēng)與清潔、儲藏與消毒以及個(gè)人防護(hù)等。嚴(yán)格遵守這些要求和注意事項(xiàng),可以確保細(xì)胞培養(yǎng)過程中的無菌環(huán)境,保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。