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PCR實(shí)驗(yàn)室裝修建設(shè)

簡要描述:新冠病毒檢測中,核酸檢測是目前可靠的篩查和確認(rèn)手段,使用也zui為普遍。而核酸檢測方法中,PCR儀無疑是本次疫情檢測的關(guān)鍵利器。但核酸檢測過程很容易受污染,整個(gè)操作需要在嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)環(huán)境中,才能保證數(shù)據(jù)結(jié)果的準(zhǔn)確性,不漏檢、錯(cuò)檢疑似病例。PCR實(shí)驗(yàn)室裝修建設(shè)

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-07-22
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應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生

那么問題來了,核酸檢測中,應(yīng)該如何建設(shè)一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室?PCR實(shí)驗(yàn)室如何設(shè)計(jì)規(guī)劃才堪稱專業(yè)?PCR實(shí)驗(yàn)室管理又有哪些注意要點(diǎn)?

PCR實(shí)驗(yàn)室裝修建設(shè)

標(biāo)準(zhǔn)的PCR 實(shí)驗(yàn)室分為四個(gè)區(qū)域,分別為:

n1.試劑配制區(qū); 

n2.樣品處理區(qū); 

n3.核酸擴(kuò)增區(qū);

n4.產(chǎn)物分析區(qū);

如使用全自動(dòng)分析儀,區(qū)域可適當(dāng)合并。

(進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行,不同的工作區(qū)域使用不同的工作服,例如不同的顏色。工作人員離開各工作區(qū)域時(shí),不得將工作服帶出) 

【各區(qū)的功能分別為】

試劑準(zhǔn)備區(qū):擴(kuò)增試劑的配制、分裝和保存。     

樣品處理區(qū):樣品登記、分裝;核酸提取、保存和加樣。    

擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū):擴(kuò)增產(chǎn)物的測定、結(jié)果分析、登記及報(bào)告。  

擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開,須使用不同的房間,兩區(qū)之間有一定的間隔。  

使用商品化試劑盒可在樣品處理區(qū)進(jìn)行少量試劑配制。     

在滿足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區(qū)和試劑準(zhǔn)備區(qū)可設(shè)在同一房間內(nèi):    

在生物安全柜內(nèi)操作;每個(gè)實(shí)驗(yàn)人員、實(shí)驗(yàn)組分別使用各自的試劑及耗材;    

盛放污染材料的器皿密封并一次性使用;  用有效的方法對操作區(qū)域和共享器具在實(shí)驗(yàn)前后進(jìn)行清潔及消毒。

PCR實(shí)驗(yàn)室裝修建設(shè)要點(diǎn)

1、主體結(jié)構(gòu): 

主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁,從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。結(jié)構(gòu)牢固,線條簡明,美觀大方,密封性好。

2、標(biāo)準(zhǔn)的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié):

將PCR過程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和PCR擴(kuò)增檢測三個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)。整個(gè)區(qū)域有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū), 同時(shí)各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié),使整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。

可打開緩沖區(qū)Ⅰ,緩沖區(qū)Ⅱ和 PCR 擴(kuò)增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣,在實(shí)驗(yàn)區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口,空氣通過回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。

3、 消毒:

在三個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)和三個(gè)緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈,供消毒用。

在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū) 還設(shè)置移動(dòng)紫外線燈,對實(shí)驗(yàn)桌進(jìn)行局部消毒。

4、機(jī)械連鎖不銹鋼傳遞窗:

試劑和標(biāo)本通過機(jī)械連鎖不銹鋼(不建議使用電子連鎖方式)傳遞窗傳遞,保證試劑和標(biāo)本在傳遞過程中不受污染(人物分流) 

5、 地面

地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面,整體性好。便于進(jìn)行清掃,耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面,或大塊的瓷磚(至少800mm×800mm)接縫需要小于2mm。

6、照明

燈具要選用凈化燈具,能達(dá)到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。

在建設(shè)的過程中應(yīng)注意

●規(guī)范的安裝流程和全面的服務(wù)流程。 

●嚴(yán)格按照規(guī)范科學(xué)設(shè)計(jì)的安裝流程。

●安裝前需要確定以下安裝條件,如:電源電壓,電源進(jìn)線位置,電話網(wǎng)絡(luò)線進(jìn)線位置,進(jìn)水水壓,小安裝空間,地面平整度,通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管的位置等,理想狀態(tài)的空間尺寸和通風(fēng)口尺寸。

PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)要點(diǎn)

PCR實(shí)驗(yàn)室可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組PCR實(shí)驗(yàn),通常應(yīng)經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析四個(gè)實(shí)驗(yàn)過程,若實(shí)驗(yàn)工藝需要,還應(yīng)增加樣品粉碎過程。

一、分散形式PCR實(shí)驗(yàn)室

所謂分散形式PCR實(shí)驗(yàn)室,是指完成上述實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)用房彼此相距較遠(yuǎn),呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實(shí)驗(yàn)室,由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)之間不易相互干擾,因此無需特殊條件要求。 

二、組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室

所謂組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室, 是指完成PCR四個(gè)實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)用房相鄰布置,組成獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)域的形式。對于組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室,由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)間集中布置,容易造成相互干擾,因此,對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間,以減少室內(nèi)外空氣交換。

環(huán)揚(yáng)未來實(shí)驗(yàn)室對PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)一些經(jīng)驗(yàn)分享:

試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入,造成污染;

可以通過控制進(jìn)風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達(dá)到正壓效果。

核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓,以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品,可以通過控制排風(fēng)風(fēng)量大于進(jìn)風(fēng)風(fēng)量達(dá)到負(fù)壓效果。 

在理想情況下,PCR實(shí)驗(yàn)室緩沖間內(nèi),可設(shè)置正壓,使室內(nèi)空氣不流向室外,室外空氣不流向室內(nèi)。 PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)風(fēng)由原有中央空調(diào)控制,要求將中央空調(diào)風(fēng)口安裝到定點(diǎn),且高度為地面鋪裝好后2600mm處。

如果使用熒光PCR儀,擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室可以合并。

若房間進(jìn)深允許,可設(shè)PCR內(nèi)部走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面,緩沖間比走廊更有意義。

各個(gè)區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護(hù)屏障,避免實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾,防止核酸氣溶膠對實(shí)驗(yàn)過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)室的墻體,包括頂棚,應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好;所有陰角宜采用圓弧形線條過渡;墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;地面材料應(yīng)滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。

PCR實(shí)驗(yàn)室主要設(shè)備

試劑準(zhǔn)備區(qū) 

儀器設(shè)備主要有冰箱、超凈臺(tái)、加樣器、混勻器、天平和離心機(jī)等,加樣器、天平除了要外,還應(yīng)有定期校準(zhǔn)。   試劑分裝應(yīng)在超凈臺(tái)中進(jìn)行  擴(kuò)增反應(yīng)混合液應(yīng)使用分子生物學(xué)級的,試劑制備好后應(yīng)有質(zhì)檢:一是否有污染、二是檢測試劑的擴(kuò)增效果。

標(biāo)本制備區(qū) 

儀器設(shè)備主要有生物安全柜、加樣器、離心機(jī)、溫育儀、混勻器等  

擴(kuò)增區(qū) 

擴(kuò)增區(qū)的主要儀器是核酸擴(kuò)增儀、超凈臺(tái)、微量加樣器、離心機(jī)、可移動(dòng)紫外燈。擴(kuò)增儀需進(jìn)行校準(zhǔn)。并配備UPS電源,以防止由于電壓的波動(dòng),停電對擴(kuò)增效果的影響。

分析區(qū) 

本區(qū)所使用的儀器設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器和水浴箱等 潔凈實(shí)驗(yàn)區(qū)的緩沖間部分面積不能超過主實(shí)驗(yàn)室的八分之一,這是有規(guī)定的。 

一些瑣碎的、不可忽略的實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)

1.實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)及壓力控制 

PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求,但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式。同時(shí),要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。

2.污染的預(yù)防與控制  

PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問題是如何避免污染。在實(shí)際工作中,常見的有以下幾種污染類型:擴(kuò)增產(chǎn)物的污染;天然基因組DNA的污染;試劑的污染以及標(biāo)本間的污染。由于一旦發(fā)生污染,實(shí)驗(yàn)就必須停止,直到找到污染源為止,而且實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須作廢,需重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。所以發(fā)生污染后再圍繞實(shí)驗(yàn)室來尋找污染源不但耗時(shí)而且繁瑣,浪費(fèi)人力物力。因此要避免污染,首先應(yīng)是預(yù)防,而不是排除。

PCR實(shí)驗(yàn)室*的嚴(yán)格管理

(1)嚴(yán)格控制進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室的人員。與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的人員不得隨意進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室,有條件的情況下要設(shè)置獨(dú)立的通道和進(jìn)出整個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)的門; 

(2)盡量減少在實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)以減少交叉污染的可能性。 

(3)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)是主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源,廢液不能在實(shí)驗(yàn)室中傾倒,必須經(jīng)消毒液浸泡消毒后在遠(yuǎn)離實(shí)驗(yàn)室的地方棄掉,用過的吸頭等一次性材料也應(yīng)經(jīng)消毒液浸泡消毒后統(tǒng)一處理,如焚燒等; 

(4)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可能會(huì)用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì),應(yīng)特別注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)。完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施是保證實(shí)驗(yàn)工作的必要條件,應(yīng)根據(jù)各個(gè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器,如超凈工作臺(tái)、離心機(jī)、加樣器等。

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